中医学开题报告中医学-中医学是研究人体生理病理，疾病诊断与防治以及摄生康复的一门传统医学科学，至今已有数千年的历史。对于如此深厚的东西，当然是要研究了!那么对于如何写中医学开题报告，是否有很多疑惑下面是小编为大家整理的中医学开题报告（完整）,供大家参考。
中医学开题报告
中医学-中医学是研究人体生理病理，疾病诊断与防治以及摄生康复的一门传统医学科学，至今已有数千年的历史。对于如此深厚的东西，当然是要研究了!那么对于如何写中医学开题报告，是否有很多疑惑呢?今天小编收集了相关范文，供大家参考!
中医学开题报告篇一：
选题依据、目的和意义：
骨折不愈合是骨科临床常见病症，其中以四肢长骨多发，例如胫骨，股骨，肱骨等，针对四肢长骨骨折不愈合二次手术我院多才用植骨术配合LCP重新内固定。自体髂骨作为植骨材料具有较多的优点：如取材简单、组织相容性好、无移植排斥反应、骨诱导作用强等，这些优点使得髂骨成为一种最佳的植骨供材，这在临床上已形成共识。植骨是治疗骨折不愈合的重要方法,其机制是爬行替代所引起的支架作用与供给矿物质的作用,爬行替代顺利进行的条件要求准确的复位、充分的植骨和坚强的固定。为达到充分的植骨，及早促进骨折愈合，我们采用髓内外36°植骨的方法，外用钢丝环扎，配合LCP坚强内固定，术后3~1个月内进行随访，根据愈合情况和功能恢复情况分析手术的临床疗效。选题目地在于探讨治疗四肢长骨骨折不愈合的手术改进方法和疗效，为临床治疗提供参考。
本课题目前国内外研究的动态、水平
治疗骨折不愈合，可分为手术治疗和非手术治疗，其中手术治疗最重要的就是植骨术加更改断端内固定。骨折不愈合应用自体骨移植治疗效果显著，已经形成共识。 植骨是治疗骨不连的重要方法,植骨方式临床多采用髓内外联合植骨。沿肌间隙进入, 骨膜下小心剥离显露骨折部位, 取出内固定器械, 清除骨断端间瘢痕, 咬除硬化骨, 打通髓腔, 修整骨折端, 手法复位, 按照骨缺损情况取骨。髓内植骨以比髓腔稍粗的骨棒,贴紧髓腔骨质;髓外上盖植骨宜用螺丝钉固定植骨块;骨碎屑充分填充残余的空隙,这样才能确实达到植骨的目的和要求。自体皮- 松质骨植骨的爬行替代缩短了骨折愈合过程,新鲜的自体骨具有生物活性,不存在免疫排异,无传染疾病的风险,同时存在骨传导和骨诱导能力。
内固定物更换得坚持以下原则，原钢板内固定者,可更换成交锁髓内针或更长的钢板置于张力侧;原交锁髓内针内固定者,可选用更大号髓内针或钢板内固定;原先短钢板内固定者，可改成较长的钢板。所有病例均需植骨。更换内固定物后,，术后石膏外固定者,应及早进行肌肉收缩锻炼活动,骨痂生长良好后,去石膏开始关节屈伸功能锻炼。但是临床上医师应该具体问题具体对待，可以根据骨痂生长情况酌情处理,出院时务必详细医嘱病人注意事项,配合医生,直到骨折完全愈合。 LCP钢板内固定适用于四肢长骨骨折不愈合,可用拉力螺钉固定碎骨块及移植骨块, 并对断端行轴向加压锁定。手术关键是将骨折端的瘢痕结缔组织全部切除, 骨端硬化骨全部咬除, 露出正常骨质, 钻通髓腔, 植入的骨块必须牢固的嵌入缺损区, 间隙用松质骨填满,。应积极正确指导术后功能锻炼, 严格定期随访及指导。避免过早的不正确的负重。。综上所述，对于骨折不愈合的治疗，自体骨移植疗效确切，安全稳妥，技术成熟，应用广泛，值得提倡。
课题研究的主要内容
病例来源
本研究病例均采集于山东中医药大学附属医院骨科病房
采集时间 20xx年5月～20xx年1月
诊断标准
(1)病史：明确的外伤史，骨折后6个月没有愈合，并且没有进一步愈合倾向已有3个月。
症状：患者骨折端成角、旋转、侧移位、短缩畸形或者节段性骨缺损、持重疼痛或不能持重、局部在应力下疼痛等。
(3)体征：局部窦道形成、流脓、假关节形成或伴有局部软组织瘢痕、缺损等
(4)辅助检查：X线表现：骨端硬化，髓腔封闭;骨端萎缩疏松，中间存在较大的间隙;或骨端硬化，相互成为杵臼假关节等这三种形式中的任何一种就可以定为骨折不愈合。
纳入病例标准：
(1)符合本病诊断标准;
骨折平均愈合时间超过半年以上，有假关节形成;
(3)骨折平均愈合时间超过半年以上，多次复查X线拍片显示，骨折线
清晰可见，未见内外骨痂或内外骨痂极少;
(4)拍片显示骨折线增宽，骨折端骨面致密性硬化，骨髓腔封闭，骨质疏松，骨痂间无骨小梁形成，或伴有明显的骨缺损;
(5)临床表现有骨的感染、缺损、畸形、肢体不等长、局部窦道形成、流脓等。
排除病例标准：
(1)不符合上述诊断标准者
患者有严重的内科疾病，不能够耐受手术者
(3)精神疾病患者
疗效观察方法
对骨不连愈合的评价应包括骨愈合和功能恢复双重评价：
(1)骨愈合评价标准：本评价结果决定于四项指标:骨愈合、感染、畸形和肢体长度，其中骨愈合标准为X线示骨折线模糊，有连续骨痴通过骨折线，拆除或试行松动外固定物后骨折无异常活动，下肢可无痛行走，上肢持物骨折处有稳定感。
评价标准:
优:骨折愈合，无感染，断端畸形《°，双侧肢体不等长《 CM。
良:骨折愈合及其他三标准中两项。
可:骨折愈合及其他三标准中一项。
差:骨折未愈合或再骨折或虽愈合但不具备其他三标准中任何一个。
功能评价标准
功能的评价分上肢与下肢的不同，上肢主要考虑其灵活性，而下肢主要功能为负重行走。
将下肢评价指标定为以下五项:①明显跛行;②踝或膝任何一关节僵硬(完全伸膝或踝完全背伸时，活动范围较正常或对侧丧失15°以上):③软组织情况不良;④有限制活动或影响睡眠的疼痛存在:⑤丧失工作能力或生活不能自理。
优:存在工作能力且无其他四项指标。
良:存在工作能力且具以上四指标中一至二项。
可:存在工作能力并具以上指标中三至四项。
差:丧失工作能力或生活不能自理，不考虑是否具备其他指标。
对上肢功能评价参照 Seu和Hdlly对上肢功能评价标准 [3]
观察指标为三项:疼痛、关节活动范围、日常活动能力。
l:上肢功能评价标准
分数 痛疼 任一关节活动受限 日常活动差 无用力或疲劳后 持续性 《°~4°》4°
完全不受限
轻微受限
严重受限
课题进度及安排：
收集病例及随访
撰写论文、定稿
可行性分析
四肢长骨骨折不愈合由于并发症较多，治愈比较困难，手术后功能恢复过程漫长，因此在治疗过程中，经验的总结是非常必需的，也是可行的。本课题主要研究山东省中医院近年应用钢丝环扎36°植骨配合LCP内固定治疗四肢长骨骨折不愈合的治疗效果分析情况，因此在选题上可行性较强。课题的研究也得到了学校、附院等各部门、科室的大力支持。相信可以圆满地完成课题。
主要参考文献
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中医学开题报告篇二：
百合知母汤抗抑郁细胞内信号转导通路的机制研究
研究生姓名：***
导师姓名、职称：**** 教授
学科专业：基础医学院
研究方向：方剂的配伍规律及临床运用
一 研究目的与意义
1.研究目的
百合病最早见于张仲景的《金匮要略》，属中医情志病范畴。《金匮﹒百合狐惑阴属阳毒病证治》篇将“百合病”描述为：“意欲食复不能食，常默然，欲卧不能卧，欲行不行，饮食或有美时，或有不用闻食臭时，如寒无寒，如热无热，口苦，小便赤，诸药不能治，得药则剧吐利，如有神灵者，身形如和，其脉微数。”从百合病的临床表现看，与抑郁症的诊断标准有较多的相似之处。所以现代不少医家都将中医的百合病归属于抑郁症[1,2,3]。百合知母汤为治疗百合病的经典方药之一，由百合和知母两味药组成。百合宁心安神，润肺止咳;知母清热泻火，滋阴润燥。百合甘寒清润而不腻，知母苦寒降火而不燥。百合偏于补，知母偏于泻。二药伍用，一润一清，一补一泻，共奏润肺清热，宁心安神之效。主治阴虚或温热病后余热末清，以致头昏、心烦不安、失眠等症以及情志不遂，以致精神恍惚、不能自制等症。 故本课题旨在通过体动物实验揭示百合知母汤抗抑郁可能的细胞内信号转导机制。
2.研究意义
抑郁症是常见的危害人类身心健康一类精神疾病，以显著而持久的情感或心境低落为主要特征，在WHO的一项流行病学调査中发现全世界约有10%-20%的人一生中曾有过抑郁体验[4]。随着现代社会的生活压力逐渐增高、工作节奏加快，人们处于应激状态中的机会增多，抑郁症的发病率更逐年上升[5,6]，越来越多的患者正遭受抑郁症的折磨，给家庭及社会造成了严重的经济负担。因此，加强抑郁症的防治，寻找安全、有效的治疗方法，具有非常重要的社会和经济意义。
抑郁症发病机制复杂，诱因繁多，针对某一单一环节的药物难以取得满意的疗效，许多抗抑郁西药存在抗抑郁谱窄、起效慢、药价高、依从性差、副作用大及易复发等不足[7]。传统的中医学中蕴含着丰富的心身医学思想，其“形神合一论”，“天人合一论”就包含了广义的心身医学思想。因此国内外越来越重视传统中草药及复方抗抑郁的研究，开展了广泛而深入的实验研究，积累了丰富的经验，且实验研究成果在临床运用中也取得了良好的疗效，为中医学和现代心身医学的融合、发展提供了新的契机。中医心身医学研究工作逐渐起步，心身医学的中医药防治研究工作在病因病机及临床诊断方面也取得一定的进展[8]。
随着分子生物学的发展，抗抑郁药物抗抑郁作用机制已由细胞外单胺递质途径，逐步转向细胞内信号转导机制，而目前针对百合知母汤抗抑郁作用机制的研究大都局限在行为学观测、脑内神经递质和神经内分泌等方面。本研究采用大鼠慢性应激结合孤养抑郁模型，对百合知母汤的抗抑郁作用及其细胞内作用机制进行研究，以期为其进一步的新药开发研究和临床应用提供实验基础。
二 研究现状
1.百合病的研究现状
1.1百合病的起源
百合病始见于张仲景《金匮要略·百合狐惑阴阳毒病证治第三》篇：百合病者，百脉一宗，悉致其病也。意欲食复不能食，常默然，欲卧不能卧，欲行不能行，饮食或有美时，或有不用闻食臭时，如寒无寒，如热无热，口苦，小便赤，诸药不能治，得药则剧吐利，如有神灵者，身形如和，其脉微数。这段文字概括了百合病的主要症状是精神、饮食、睡眠、行为、语言、感觉的失调，与西医学抑郁症的主要症状有颇多相似之处。“百脉一宗者，分之则为百脉，合之则为一宗”因人体百脉同出一源，源病则百脉合病，周身受累，因此而得名百合病。
1.2百合病的病因病机 百合病的病因病机为伤寒热病之后，余热伤阴，或情志不遂，郁热伤阴，导致心肺阴虚内热，百脉失养而成。病机特点是心肺阴虚内热，心神失养，以神志改变为主要临床特点。心肺阴虚，余邪未尽，则出现口苦、小便赤、脉微数。该组症状是百合病的主要客观体征。百脉遍布周身，百脉失和，则行动感觉变异，如“欲卧不能卧，欲行不能行”“意欲食复不能食，饮食或有美时，或有不用闻食嗅时”“如寒无寒，如热无热”等。神志失和，则现“如有神灵者”“常默默”。
1.3百合病的治疗法则
百合病以心肺阴虚为基本病机，以滋养心肺、润燥安神为治疗法则。可“随证治之”分为以下几型：①正治法：“百合病，不经吐、下、发汗，病形如初者，百合地黄汤主之。”百合病未经误治，日虽久而病形如初者，以滋养心肺阴血，清热安神为法，以百合地黄汤主之。取百合润养心肺，清气分虚热，生地滋养心血，清血分虚热，泉水煎药，取清热助阴，血热从小便下行之功。诸药合用，心肺得养，气血同治，阴复热清，百脉和调，病症自除。②误汗后：“百合病发汗后者，百合知母汤主之。” 百合病误用汗法，汗后阴液受伤，心肺阴虚加重，燥热尤甚，除具备百合病的基本症状外，尚可出现津伤燥热的心烦、少寐、口干或渴、午后潮热、小便短少等症候。治宜养阴清热、润澡除烦，用百合知母汤主治。③误下后的滑石代赭汤(百合、滑石、代赭石)。④误吐后的百合鸡子汤(百合、鸡子黄)。⑤久病变渴的外用百合洗方(百合)。如内服外洗仍口渴不解，方用栝蒌牡蛎散(栝蒌根、牡蛎)。⑥久病变发热的百合滑石散(百合、滑石)。
2.抑郁症的研究现状
2.1抑郁症的起源
抑郁症是一种情感性精神障碍，临床上以情绪低落、思维迟缓和精神运动性抑制为特征，其它症状包括丧失自尊、不恰当的内疚感、死亡和自杀念头、注意力集中程度降低以及睡眠和食欲减退，还可能伴有各种躯体症状。
抑郁症是一种最普通的精神疾病。我国对情感性精神障碍进行流行病学调查1985年：终生患病率约为12%。我国对抑郁症的识别率低,临床漏诊率达50-60%。一般内科医生对包括抑郁症在内的心理障碍的识别率只有15.9%,约只有1/4的抑郁症病人才能接受正规治疗。有专家认为我国抑郁症的发病率应为10-15%，随着人口的逐步老龄化，抑郁症在60岁以上人群中的发病率将高达 20%～50%。1994年WHO全球调查发现,抑郁症的现症患病率现症患病率为11.4%,终生患病率为20-30%。约13 - 20%的人一生中曾有过至少一次抑郁体验。《20xx 年世界卫生报告》指出，抑郁症目前已成为世界第四大疾患，到 20xx 年抑郁症可能成为仅次于心脏病的第二大疾病，抑郁症正在成为一个严重的全球问题[9-13]。
2.2抑郁症的发病
抑郁症的病因十分复杂，一般认为病因可能与遗传、人格特征、心因因素有关。其发病机制也处于假说阶段，主要包括单胺递质学说、神经内分泌学说、信号通路学说[14-15]。
单胺假说作为抑郁症研究的重点认为单胺类神经递质(如5-轻色胺、多巴胺、去甲肾上腺素等)的失衡可导致抑郁的发生。大量研究亦显示抑郁症与遗传、神经、心理等因素诱发的中枢5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺(Norepinephrine,NE)、多巴胺(Dopamine, DA)等单胺类神经递质含量降低及其受体功能下降有关 [16-17]。有研究[18]表明抑郁模型大鼠下丘脑、纹状体、海马内 5-HT、NE及DA 及其代谢产物、合成前体的含量明显降低。这也支持了经典的单胺递质学说。①5-HT：抑郁症的发病机制涉及突触间隙5-HT水平及5-HT受体亚型功能的失调。5-HT功能活动降低,则患者心情抑郁、食欲减退、运动活动减少。Coppent[19]等于1965年首先提出5-HT与抑郁症有关,认为抑郁症是由中枢神经系统5-HT释放减少,突触间隙的含量下降而引起的。近年来,研究发现了很多5-经色胺的受体亚型,使得5-HT递质系统与抑都症发病的关系越来越受到关注。②NE：大量研究证明脑内N E的绝对或相对缺乏会引起情绪低落、心境抑郁。Schildkraut[20]于1965年首先提出抑郁症的发生是由于脑中NE不足所致,中枢神经系统中NE含量不足则发生抑郁症NE的缺乏可能是由于内源性的生成释放异常或由于NE系统慢性刺激所致的继发性粍竭[21]。Bmnello[22]等指出,自从发现一些药物通过改变NE代谢既能导致抑郁症又能缓解抑郁症,NE在抑郁症中所起的作用越来越受到关注。③DA：1975年Randrup首先提出,抑郁症的发病可能与DA有关。后来Maj等研究者证实,几乎所有长期抗抑郁治疗的患者都会增加D A诱导的奖赏反应。1983年Willner等提出抑郁症存在DA功能的降低,尤其是伴随有精神运动迟滞的患者[23]。对抑郁症自杀者尸检结果提示,抑郁症自杀患者尾状核和伏核的DA代谢率降低[24]。
目前,抑郁症的神经内分泌机制研究中,下丘脑一垂体一肾上腺轴(HPA轴)功能亢进是较为公认的发病机制之一。大量研究显示,抑郁症患者的HPA轴功能 亢进,血浆促肾上腺皮质激素释放激素CHR、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质 醇(CORT)浓度明显升高,而且这种功能亢进是依赖性的,随着抑郁的恢复,HPA轴的功能也逐步恢复正常[25]。Catalan[26]等发现抑郁症患者下丘脑及下丘脑外的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)浓度都升高,重度抑郁组比轻度与中度抑郁发作CRF血浓度更高,且CRF与皮质醇血浓度显著相关。 在发病机制方面，受体后信号通路及其第二信使系统在该病发病及治疗中的作用是当前研究的热点。以脑内cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein ,CREB )为交汇点的细胞内信号转导通路正受到越来越多的关注，尤其是海马CREB的改变。早在1996 年，Nibuya[27]等就报道抗抑郁治疗，大鼠海马 CA1 区、CA3 区和齿状回均可见CREB mRNA的表达增多。CREB 可能是各种抗抑郁信号转导通路的交汇点。海马CREB的表达和活化受到多种信号分子和信号通路的影响：
①腺苷酸环化酶/环磷酸腺苷/蛋白激酶A通路(AC/cAMP/PKA通路)，是研究最早的抗抑郁通路。其主要过程是：胞外信号激活胞膜上G蛋白耦联受体→AC激活→胞内cAMP升高(降解cAMP的酶主要是磷酸二酯酶)→PKA激活→CREB磷酸化→调节基因转录→生物学效应。Li和Branski[28,29]等实验研究发现海马cAMP通路的激活对改善抑郁症状起积极作用。
②酪氨酸激酶受体B/丝裂原活化蛋白激酶/核糖体 S6激酶通路(TrKB/MAPK/RSK通路)，是一条和细胞生长、增殖、凋亡以及突触可塑性密切相关的信号通路。在各种 MAPK 通路中，细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)信号通路与抑郁症关系最为密切。ERK1/2 通路激活的大致过程是：TrKB 的激活→MAPK激酶激酶(MAPKKK, RAF)的激活→MAPK激酶(MAPKK, MEK)的激活→ERK1/2的激活→RSK的激活→ CREB 磷酸化→调节基因转录→生物学效应。抑郁症患者的尸检报告显示脑内MAPK减少可能是严重抑郁症的病因之一[30]。
③Ca2+/钙调蛋白/钙调蛋白依赖的蛋白激酶通路(Ca2+/CaM/CaMK通路)，通路涉及多种离子通道、受体和酶，其激活的主要过程是：胞浆内钙浓度升高→钙离子与CaM结合→激活CaMK→CREB磷酸化→调节基因转录→生物效应。王庆松等 [31]利用猫对大鼠造成急性捕食应激，发现在捕食应激后大鼠海马细胞内 CaM 信 号通路调控紊乱，表现在细胞内 Ca2+浓度明显升高，Ca2+-CaM 复合体增多，CaMK的表达升高，提示海马该信号转导通路在严重心理应激所致的行为异常中可能有重要意义。
3.百合知母汤的研究现状
3.1百合的研究现状
方中百合为百合科植物百合Lilium brownii F. E. Brown var. colchesteri Wils.、卷丹 Lilium lancifolium Thunb.和细叶百合 Lilium pumilum DC.的肉质鳞茎。味甘，性微寒。入心、肺经。本品气味稍缓，甘中有收，既能清心肺之余热，而敛气养心、安神定魄，用于治疗热性病后、余热末尽所引起的神思恍惚、烦躁失眠、莫名所苦的“百合病”，又能润肺止咳，用于治疗肺燥咳嗽，或肺虚久咳，或阴虚久咳、痰中带血等症。 百合中主要含有酚酸甘油酯、苷类、生物碱及多糖，另外还含有一些磷脂、蛋白质和无机元素。药理研究表明百合具有抗癌、止咳、耐缺氧与抗疲劳、提高机体细胞免疫功能等作用[32-34]。
3.2知母的研究现状
方中知母为百合科植物知母 Anemarrhena asphodeloides Bge.的根茎。味苦、甘，性寒。入肺、胃、肾经。本品质润，苦寒不燥、，沉中有浮，降中有升。上行能清肃肺气，以泻肺火，润肺燥、除烦热、止咳嗽，用于治疗温热病，邪在气分，症见高热、烦躁、口渴、脉洪大者，以及阴虚燥咳，或肺热咳嗽诸症;入于中，善清胃火、除烦渴，用于治疗消渴病之中消诸症;行于下，则能泻相火、滋肾燥，用于治疗阴虚火旺、骨蒸潮热、盗汗等症。
知母主要含有皂苷、黄酮、双苯吡酮、木脂素等成分。现代研究表明，知母具有抗病原微生物、抗血小板聚集、降血糖、解热、抗炎、降低转氨酶等多种药理活性[35-37]。
3.3 百合知母汤的研究现状
百合知母汤有养阴清热、除烦润燥之效，以润养心肺为大法，治疗百合病误汗后，津液受伤，虚热较甚者。临床上运用百合知母汤治疗乳腺增生病[38-39]、长期低热[40]、消渴、喘证、盗汗、胃脘痛[41]、失眠[42]、抑郁[43]等症。
三 研究思路与立题依据
1.研究思路 百合知母汤是《金匮要略》中治疗百合病的经典方剂。百合病的描述“百合病者，百脉一宗，悉致其病也，欲卧不能卧，欲行不能行……意欲食复不能食，常默默，如有神灵者……”主要归纳为情绪障碍、躯体不适，与现代医学抑郁症的诊断标准有很大的相似性，因此一般将百合病归属于抑郁症范畴。百合知母汤中的部分有效成分能通过提高抑郁症大鼠大脑皮层单胺递质、抑制HPA轴亢进、提高模型动物脑组织BDNF含量等途径发挥抗抑郁效应。
CREB 可能是各种抗抑郁信号转导通路的交汇点。抗抑郁药物(包括中药)或其它治疗措施可通过调节一种或几种通路，最终激活CREB，调节 BDNF 等基因表达，影响神经元增殖、分化、成熟等可塑性改变，发挥抗抑郁作用。参与调节CREB的各调节因子之间、通路之间存在复杂的交叉联系和相互作用，共同维持着CREB活性的平衡。近年来研究提示：抑郁模型小鼠，存在神经元蛋白和营养因子在海马的表达异常，而这些变化可以被一些中药逆转[44]。当前致力于阐明信号通路、CREB、营养因子、神经再生之间是如何相互联系的，以及细胞靶点、分子应答、行为反应的调节与抗抑郁之间错综复杂的关系。这将有助于我们以CREB为中心了解抑郁症的病理生理机制，并在此基础上研发出疗效可靠、起效迅速、副作用小、经济实用的新药，尤其是帮助我们更好地认识一些中药抗抑郁的可能机制，更充分地利用祖国宝贵的中医药资源。
细胞内信号转导通路是目前抗抑郁机制研究的重点和热点。可被多种不同的信号路径激活。环磷酸腺苷(cAMP)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、钙调蛋白激酶(CaMK)等3条通路是目前认为与抗抑郁相关、最主要的信号通路，这3个主要上游通路最终都使CREB磷酸化，进而调节其下游通路的基因表达，完成神经元生化功能，而CREB是上述3种通路的交汇点。
前期的研究证实：百合知母汤抗抑郁的机制与提高慢性不可预见性应激结合孤养抑郁(CUMS)模型大鼠海马组织5-HT含量、提高脑组织中CREB(cAMP反应元件结合蛋白)mRNA的表达有关(见7.3)。有鉴于此，我们提出假设：百合知母汤抗抑郁的信号机制可能与以上三种细胞内通路有关，三个通路在抗抑郁机制中可能会有所偏重。
围绕假设，基于CREB磷酸化通路，本课题拟将百合知母汤作用于CUMS大鼠，运用ELISA、RT-PCR、免疫组化、Western 印记等方法，检测大脑组织cAMP信号中cAMP和PKA、MAPK信号中TrKB和BDNF、CaMK信号中钙调蛋白(CaM)和CaMK等关键因子，初步探讨百合知母汤抗抑郁的信号机制,筛选出该方抗抑郁的基因靶点。
2.立题依据
中药复方具有成分多、作用环节多、靶点多的特点，多环节之间具有协同效应。因此研究中药及其方剂的抗抑郁作用具有极大的挖掘潜力，而且对解决日益增加的抑郁患者的痛苦有重大的社会意义[45-46]。
四 研究内容及目标
1.建立慢性不可预见性应激结合孤养大鼠抑郁(CUMS)模型;
2.通过检测用药前后模型动物大鼠海马组织环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)含量变化，评价百合知母汤对抑郁症cAMP信号的干预作用;
3.通过检测用药前后模型动物大鼠络氨酸激酶受体B(TrKB)和脑源性神经营养因子(BDNF)含量变化，评价百合知母汤对抑郁症MAPK信号的干预作用;
4.通过检测用药前后模型动物大鼠海马组织中钙调蛋白(CaM)和钙调蛋白激酶(CaMK)含量变化，评价百合知母汤对抑郁症CaMK信号的干预作用;
五 拟解决的关键问题
通过检测cAMP、MAPK、CaMK三条信号转导路径上重要调节因子cAMP、PKA、TrKB、BDNF、CaM、CaMK用药前后的变化，初步评估百合知母汤对以上三个信号转导路径的干预作用，评价方剂抗抑郁的机制，以便进一步筛选出方剂抗抑郁靶点。
六 实验研究方案
1.实验动物 SD雄性大鼠，7—12周龄，体重180—200g 2.药物制备
按照《金匮要略》中记载的方法：百合七枚(劈)(约20g)，知母三两(切)(约10g)即百合：知母=2:1。取百合100g，知母50g，先以清水将百合浸泡12小时，当白沫出，去其水，再加清水20xxml，武火煎开后改为文火，得百合煎煮液1000ml;再用清水20xxml，先武火后文火，得知母煎煮液1000ml;将2次煎煮液混合，文火浓缩得煎煮液1500ml。按照比例配制足够数量百合知母汤煎煮液，放入冰箱-20℃储存备用。临用时取出，浓缩至合适体积。为确保实验结果的可比性，所有实验都用同一批药材。所有药物的给药剂量根据“人和动物体表面积折算的等效剂量比率表”计算而来：大鼠(200g)用药量=人(70kg)日用剂量*0.018。每只大鼠的给药体积为1ml/100g。
百合知母汤终浓度为2.2g/Kg/d(成人日用量30g)
氟西汀终浓度为1.8mg/kg/d(成人日用量20mg)
各组按浓度给药28天，对照组给等体积的三蒸水。
3.CUMS抑郁症模型大鼠制备
除正常对照组外，其余动物采用慢性轻度不可预见性温和刺激结合孤养(CUMS)的造模方法：各造模组大鼠均单笼饲养，刺激因子包括禁食、禁水、4℃冰水游泳、夹尾、晃尾、潮湿垫料和倾斜45°、束缚应激、陌生物品、空笼刺激、噪音刺激、闪光刺激、水平震荡、昼夜颠倒等。每日随机给予2到3种刺激，使大鼠不能预料刺激的发生以避免产生适应。每种刺激交叉累计使用2-3次，持续21天，造模成功后，给药期间继续维持造模。建立慢性温和不可预见性应激结合孤养(CUMS)抑郁症大鼠模型,具体操作方法如下：
(1)禁水：即24小时不予供水。具体方法为,造模当天,上午8:00始,撤出大鼠笼内供水瓶,禁水24小时后,于次日上午8:00正常供水。
(2)禁食：即24小时禁止进食。具体方法为,造模当天上午8:00始,清除鼠笼内所有鼠粮,剥夺进食24小时后,禁食期间供水正常。禁食后给少量碎食,然后正常词养.
(3)昼夜颠倒：造模当天,上午8:00,将正常对照组大鼠转移至其它SPF级实验室后,关闭本实验室所有电源,模仿黑夜,至20:00准时打开实验室电源,模仿白昼,给大鼠制造昼夜颠倒的假象。
(4)夹尾：用缠裹有胶布的塑料夹,夹持鼠尾根部,时长为5min。
(5)晃尾：提住大鼠尾巴中部以每秒钟1次的频率,晃尾15分钟,晃尾时力度要轻柔,避免牵拉大鼠尾尖部位,以防脱皮
(6)冰水游泳：取一直径为30cm玻璃缸,注入适量清水后加入适量冰块,调整水温至4℃(根据天气情况,适当调整,以防冻伤),同时调整水液平面据器皿边缘约15-20cm,然后将大鼠放入冰水中,强迫其游泳5min。5min后将大鼠榜出,先用干毛巾擦拭动物毛发,然后用吹风机吹干,避免感冒。每次冰水游泳结束后需捞干净游泳器皿内大鼠类便,避免对下一只鼠产生影响。
(7)高速水平震荡：将动物放入空的鼠笼中，进行人工振荡，2 次/秒，有效节奏连续持续 5min;或者水平晃动，1次/秒，持续30分钟
(8)噪音刺激：90分贝噪音刺激2h，尽量选在白天大鼠休息的时候给予此种刺激。
(9)束缚刺激：将大鼠束缚于500ml烧杯中2h，注意保持通气。
(10)潮湿环境：将大鼠的垫料换以潮湿垫料，持续刺激12h。
(11)异物刺激：往大鼠笼内放置金属条棒，钝性玻璃器皿的异物予以刺激，持续2h。
(12)空 笼：撤掉大鼠笼里面的垫料笼子里不放置任何物品，持续12h。
(13)倾斜刺激,：该刺激因素通常在禁水后进行,应激动物本身饥渴,在倾斜的鼠笼中觅食觅水更为困难。
(14)闪光刺激：LED频闪灯，频闪频率2次/s，持续刺激2h。
以上各种刺激的实施顺序遵循由弱(轻刺激,如昼夜颠倒、禁水禁食、潮湿环境)到强(重刺激,如冰水游泳,夹尾，晃尾，束缚刺激，噪音，闪光等刺激)的原则,以避免刺激之间的交互作用。每日采用1种刺激,平均每种刺激被采用2—3次,同种刺激不能连续出现,使动物不能预料刺激的发生。
4.行为学指标的测量
主要包括 1%蔗糖水消耗率、体重变化率、敞箱实验、Morris 水迷宫实验
4.1体重变化率
分别在实验的第 1d、15d、22d、29、36d 、43d、50d、57、64d进行。动物体重变化率(%)=(当日测量的体重-第1天的体重)/第1天的体重。 4.2糖水消耗实验
实验前期准备，在安静的环境内训练动物适应含糖饮水：第一个24h，每笼同时放置两个完全相同的动物水瓶，两瓶均为同等重量的1%蔗糖水;第二个24 h， 一瓶为1%鹿糖水,一瓶为相同重量的纯净水。然后进入实验阶段，禁水禁食24h后,测定9p.m-7a.m 10小时内大鼠1%蔗糖水摄入量。糖水偏爱率% =糖水消耗量/(糖水消耗量+清水消耗量)X100%。适养期间进行三次糖水偏爱筛选,将糖水偏爱率异常的大鼠剔除,不用于正式实验(三次糖水偏爱测试中均只喝自来水的大鼠为异常大鼠)。测定动物在实验第1天、第22天、第49天、第64天糖水偏爱率的变化。
4.3 敞箱实验
敞箱实验(Open-field Test )是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。以实验动物在陌生环境中某些行为的发生频率和持续时间来反应实验动物的自主行为与探究行为,以尿便次数反应其紧张度。敞箱实验(Open-field Test):木质敞箱,立方形,长、宽、高为80cm x 80cm x 40cm,内侧壁、底面为黑色,底面用白线划分为面积相等的25块正方形。室内安静环境下将大鼠放置于敞箱底面的中心方格内,人距离敞箱1米之外,记录大鼠在3 min内活动频率。以穿越底面正方形块数为水平穿越格数(4爪均进入方格才记数,为水平运动得分)、以两后肢直立的次数为竖立活动次数(两前爪腾空或攀附墙壁,为垂直运动得分),理毛次数以及大小便次数。每只动物只测1次,测定完毕后彻底清洁敞箱再进行下一只观察。分别于实验前1天、实验第22天和最后1天进行。
4.4 Morris 水迷宫实验
该实验是对大鼠学习记忆能力的检测，主要包括定位航行实验和空间搜索实验。实验用主要装置包括一个银灰色圆形水池(直径 150cm)，一个白色平台(直径10cm)，一台跟踪摄像机以及与摄像机相连的计算机，池内盛水，且水温保持在 22-24℃。最后一次敞箱实验结束后第二天开始，首先训练大鼠寻找平台，平台置于水面下 2cm，摄像机位于水池上方约 200cm，能清晰摄取到大鼠的运动轨迹。将水池分为四个象限，将大鼠从任意一个象限放入水中，记录其找到平台的路径及时间，前几次训练中，若时间超过 120s，则引导动物到平台，并在平台上停留10s。然后进行定位航行与空间搜索实验。定位航行实验：训练结束后的第一天，保持平台位置不动，将大鼠随机从一个象限放入水中，开始记录大鼠的运动轨迹及找到平台的时间;空间搜索实验：定位航行实验结束后，将平台撤走，将动物从原平台位置的对侧放入，开始记录 120s 内大鼠的运动轨迹及潜伏期与穿越平台次数。以此做为对空间记忆能力的检测指标。
4.4 悬尾实验
将实验动物通过固定动物尾端2cm处使其头向下悬挂，动物在该环境中拼命挣扎试图逃跑又无法逃脱，从而提供了一个无可回避的压迫环境，一段时间的实验后，记录处于该环境的动物产生绝望的不动状态的时间。动物表现出的这种典型的“不动状态”，反映了一种被称之为“行为绝望状态”，这种行为绝望模型与抑郁症类似，而且对绝大多数抗抑郁药物敏感，而且其药效与临床药效显著相关。
5.尼氏染色
正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏小体，它们主要分布于神经细胞的浆中，形状有大有小，如三角形，有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色，这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)、亚甲蓝(methylene blue)、甲苯胺蓝(toluidine blue)、硫董(thionin)等将其染为蓝色。但是，当神经细胞受伤后，胞质内的尼氏体更可发生变化，严重的可消失，通过观察尼氏小体的数量可以探知神经元的受损或修复情况。
各组大鼠分别于末次给药后麻醉,使大鼠仰卧位固定于实验台上,打开腹腔,掀起右肺,在靠近脊柱处找出下腔静脉和腹主动脉。用止血钳夹住腹主动脉和下腔静脉,接着打开胸腔,用针头经左心室插入升主动脉,后剪开右心耳,进行灌注。先用0.9%的生理盐水250ml经心脏快速灌注冲洗,再用4%的低聚甲醛,O.lmol/L的磷酸缓冲液(PH7.2-7.4)350ml灌注。在灌注固定液过程中后期大鼠颈部、肩部和双前肢逐渐变硬。灌注后取大鼠全脑,10%低聚甲醛固定48-60h。以松果体为标志物,向头侧横向切取3段,每段厚2mm。石蜡包埋,连续切片,片厚lOpin,切片,用于尼氏染色及后期的免疫组化。
将脑片置于0.5%甲苯胺蓝(母液：甲苯胺蓝1g，无水乙醇100ml。使用时按1:1比例与新鲜的0.1%NaCl溶液混合成工作液)或焦油紫(焦油紫0.1g;蒸馏水99ml;1%冰醋酸1ml)中室温下染色30min。在75%、95%、100%酒精中各脱色1min，二甲苯透明10min，中性树胶封片。显微镜下观察照相并对尼氏染色阳性神经元进行计数。
6.测量生化指标
主要包括CREB、BDNF mRNA在大鼠海马内的表达;免疫组化检测TrKB、ERK1/2蛋白的表达;免疫印迹法检查CaM、CaMKⅡ的表达。
6.1逆转录-聚合酶链式反应法检测CREB、BDNFmRNA在大鼠海马内的表达 首先匀浆：海马新鲜组织约100mg,加入1ml的TRIZOL试剂,用电动勾浆器进行勾浆;两相分离:分装后样品于15到30℃孵育5分钟。每1ml的TRIZOL试剂勾浆的样品中加入0.2 ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15-30℃孵育2到3分钟。4℃下120xx g离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色紛氯仿相,中间层核上层的无色的水相。RNA全部被分配于水相中,水相的体积大约是勾浆时加入的TRIZO试剂的60%;RNA沉淀:将水相转移到新离心管中。水相与异丙醇混合以沉淀其中的RNA,加入异丙醇的量为每个样品匀浆时加入，1mlTRIZOL试剂加0.5 ml的异丙醇，混勾后15-30℃孵育10分钟后,于4℃ 12,000g离心10分钟;RNA清洗:移去上清液,每1mlTRIZOL试剂匀浆的样品中加入至少1ml的75%乙醇,清洗RNA沉淀。振荡后,4℃，7500g离心5分钟;重新溶解RNA況淀:去除乙醇溶液,空气中干燥RNA沉淀5-10分钟,切勿真空离心干燥，注意RNA沉淀不要完全干燥,否则将大大降低RNA的可溶性，部分溶解的RNA样品A260/280比值将小于1.6;溶解RNA时,先加入无RNA酶的水用枪反复吹打几次,然后55-60℃孵育10分钟。莰得的RNA溶液保存于-70℃;浓度测定:取少量液体用TE稀释(一般1: 100稀释)后,读取其在紫外分光光度计260nm和280nm处的吸收值,A260下读值为1表示40ugRNA/ml;样品RNA浓度(ug/ml)=A260×稀释倍数40ug/ml;RNA纯度检测:RNA溶液的A260/A280的比值范围应在1.8-2.1之间;
在无核酸酶的离心管中配制反应液： RNA，1-5μg;逆转录引物 (20um)，1μl;RNase free H2O，使总体系为12.5μl(反应液配制在冰上进行)。轻轻混匀,65℃变性10min，立即置于冰上2min后加入：RNA-primer mix，12.5μl;5×RTReaction Buffer ，4μl;dNTP(10mM)，2μl;RiboLock RNase Inhibitor ，0.5μl;RevertAid Reverse Transcriptase，1μl。总体系20μl，25℃孵育10min后42℃孵育60min，70℃ 加热灭活10 min，-20℃保存。 设计相应的引物，配制成合适浓度工作液，Real time-PCR仪反应体系液配制：2X all-in-OneTM qPCR Mix(含ROX)，10μl;引物(10pmol/μl)，上下游各0.4μl;ddH2O，4.2μl;cDNA(适度稀释) ，5μl。总体系20μl。反应条件：95℃，10min,以下反复40个循环;95℃,10s;60℃，20s;72℃，20s。最后结果采用2-ΔΔCT法进行测量。
6.2免疫组化法检测TrKB、ERK1/2的表达
切片后,常规脱蜡至水;3%过氧化氢孵育lOmin,可以灭活内源性酶的活性,蒸水冲洗,5minx3次;微波热修复3min,PBS冲洗,5minx3次;滴加5%BSA封闭液,室温孵育30min;滴加一抗,5-HTiaR 一抗稀释为1:50,PKA稀释为1:100,CREB稀释为1:100,4°C过夜,PBS冲洗,5minx3次;滴加二抗生物素标记的羊抗兔IgG,37°C孵育30min,PBS冲洗,5minx3次;滴加三抗试剂SABC,37°C孵育30min,PBS冲洗,5minx3次;DAB显色剂显色,室温下15inin,蒸馈水冲洗,脱水,透明,封片最后DAB 显色剂显色，室温下20min，蒸馏水终止反应，常规脱水、透明、封片，显微镜下观察。每只动物取相同部位的3张切片，每张切片选取3个视野，在同一放大倍数、同一光强度下，采用CMLAS 彩色病理图像分析系统，分别计算每张切片中海马组织TrKB、ERK1/2表达的平均光密度。
6.3免疫印迹法测定钙调素(CaM)、钙调蛋白激酶(CaMKⅡ)蛋白表达变化
取新鲜海马约100mg置1.5mlEP管中，生理盐水冲洗两遍，充分剪碎，离心去上清。每管加4℃裂解液1ml，继续剪碎、混匀，低温超声匀浆;14000转离心，5min，取上清备用。取上清5μl，加考马斯亮蓝3μl，去离子水95μl，595nm 处，1cm光径，蒸馏水调零，测各管OD值;根据样品OD值调整蛋白浓度。样品煮沸5min，冷却后取50μg上样;电件(12%浓缩胶：90v30min;10%分离胶：120v120min);NC膜转印(70v120min);5%脱脂奶粉TBST溶液封闭抗体，摇床2h，TBS漂洗5min，3次。一抗孵育(兔抗人CaM、CaMKⅡ多克隆抗体1:500稀释)，4℃过夜;二抗孵育(辣根酶标记羊抗兔IgG 1:1500稀释)，37℃ 1h;扫描并分析结果，条件设置为曝光2min，CCD自动获取图像，同时以1:1000稀释的小鼠抗大鼠beta-actin单克隆抗体作为内参照，各蛋白相对表达量以相应蛋白/beta-actin灰度值表示。
九 课题创新性
1. 本课题首次系统地由宏观到微观地进行综合研究，能从行为学水平→细胞形态水平→分子水平三个层次经行分析，以期待比较完善地探索百合知母汤抗抑郁功效及其机理。
2. 本课题选用了先进的指标，并且采用蛋白水平和mRNA水平检测方法，检测神经营养因子及相关细胞内信号转导通路中关键因子的变化，以期探寻本方提高抑郁症大鼠脑组织CREBmRNA的表达水平的进一步信号转导机制。
十 预期结果
1. 成功完成大鼠抑郁症CUMS模型的建立，构建良好的实验平台。
2. 探讨百合知母汤抗抑郁机制中三种信号转导系统发挥的作用，筛选百合知母汤抗抑郁的靶点通路。
3. 预计在国内学术期刊上发表论文2篇。
参考文献
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中医学开题报告篇三：
研究背景及意义
研究背景
随着医疗卫生体制改革的进一步深入，医院的经营模式及所有制形式正处在变革当中，医院国家、集体、个体等多种所有制并存的形式代替了原来单一的国家所有，国有医院的经营模式和运行方式也在朝着适应市场运作规律的方向发展，医院必将面临日益激烈的竞争。
在新形势下，随着国家卫生改革政策的不断推进，医疗市场的竞争迫使医院必须抓管理，讲效益，运用营销策略[1]。关于医院营销论文开题报告，因此，医院管理者要转变观念，运用现代营销学的观点，通过营销手段树立良好的医院品牌形象，提高竞争力，更好地满足广大人民群众对医疗服务的多层次需求，根据我国卫生事业的性质，借鉴国内服务行业市场营销和国外医院市场营销的成功经验，并结合我国的国情，建立一套适合中国医院发展的市场营销模式。
近几年来，国内大部分医院开始有市场营销的意识，开展了一些诸如广告、传播、服务措施优质化与多样化的操作。但由于缺乏系统的营销理论和实操经验，许多操作还很不规范，使医院的市场营销工作很难有针对性，其结果是医院在制定竞争策略时大多没有体现差异，缺乏个性，形不成自身的核心竞争力。
湖南省中医院是一所有着 7余年历史的省级中医名院。素有 湖湘中医发祥地 三湘名医之摇篮 誉称。属国家三级甲等中医医院，是省内集医疗、保健、教学、科研于一体的中医龙头医院之一。
拥有 17 个中医特色专科和 5个中医专科专病门诊，其中 4 个国家重点专科、6 个湖南省重点专科。开放病床 606 张。医院正在着手修建一栋 28 层医疗教学综合大楼，大楼建成后将增加病床 100张最新医学论文开题报告模板精选3篇最新医学论文开题报告模板精选3篇。湖南省中医院历史悠久、名医荟萃、中医特色浓郁、专科专病建设突出。但医院身居闹市，周边医院林立，市场竞争激烈 。因此，正视服务营销在医院发展中的作用，提升医院的知名度和美誉度，提高医院的市场占有率，让更多的病友享受到中医简便廉验的预防与治疗，是当前一个亟需思考、比较迫切的问题;如何利用服务营销的系统理论，对湖南省中医院进行服务营销策略研究显得迫在眉睫。
选题意义
新时期，医疗机构的改革和医疗市场的竞争给医院的发展带来了机遇，同时也带来了挑战。在充满竞争的市场经济中，医院管理者已经开始意识到营销的重要性，重视医院营销活动，但当前许多医院，由于其特定的专业性、技术性，缺乏整体的市场营销理念和理论，没有充分发挥营销在医院发展中的重要作用。
研究思路与基本框架
关于医院营销论文开题报告，论文主要包括以下五个部分的内容：第一章绪论。介绍本文的研究背景、研究的方法以及对医院服务营销、医疗服务消费者研究、服务质量理论、关系营销理论、内部营销理论。
第二章运用波特五力模型、SWOT 分析法等对湖南省中医院服务营销内外部环境进行深入分析。
第三章通过对湖南省中医院市场进行细分，对其目标市场选择和定位进行深入研究。
第四章是在前文分析研究的基础上，系统而又有重点的分析和制定医院服务产品、服务价格、服务渠道、服务促销、服务人员、服务过程、有形展示等要素的具体应用策略。
第五章是提出实施湖南省服务营销策略的保障措施。
最后对本文进行总结。
